篩選獲得一株 產(chǎn) β-半乳糖苷酶的克雷伯氏菌，該酶具有較好的 轉(zhuǎn)糖苷活性。 首次對(duì)克雷伯氏菌來源的 β-半 乳糖苷酶基因進(jìn)行重組表達(dá)， 成功得到具有優(yōu)良 轉(zhuǎn)糖苷活性的 β-半乳糖苷酶，并探究其酶法轉(zhuǎn)化 乳糖合成 GOS 的工藝條件，為豐富 β-半乳糖苷酶 資源及低聚半乳糖制備提供理論依據(jù)。水平搖床，江蘇其林貝爾儀器制造有限公司； 電熱鼓風(fēng)干燥箱、YXQ-50SII壓力蒸汽滅菌器，上海博迅實(shí)業(yè) 有限公司；生物安全柜，青島海爾特種電器有限公 司；高速離心機(jī)，英國(guó) BECKMAN COULTER；超聲 波細(xì)胞破碎儀，南京南京先歐儀器制造有限公司； PCR 儀， 德國(guó) Biometra 公司； 凝膠成像儀， 上海 Tanon 公司；Multitemp III 恒溫循環(huán)水浴器、 瓊脂 糖凝膠電泳儀， 美國(guó) GE 公司；Agilent 1260 高效 液相色譜-示差折光檢測(cè)器，美國(guó) Agilent 公司。

    經(jīng)重組 表達(dá)后的 β-半乳糖苷酶酶活力比野生菌株提高 約 10 倍，且轉(zhuǎn)糖苷活性保持在較高水平。 酶法轉(zhuǎn) 化乳糖過程中， 最優(yōu)條件下可使 GOS 得率達(dá)到 44%， 與已報(bào)道的 β-半乳糖苷酶相比具有良好的 轉(zhuǎn)糖苷作用。 該研究結(jié)果表明克雷伯氏菌 B5582Y 來源的 β-半乳糖苷酶及其重組酶在低聚半乳糖 合成中具有較大的應(yīng)用潛力。